Epo mikä se on

Erytropoietiini (myös englanninkielinen erytropoietiini, EPO) on yksi munuaishormoneista. Kemiallinen rakenne on glykoproteiini.

Fysiologinen rooli

Erytropoietiini on erytropoieesin fysiologinen stimulaattori. Se aktivoi erytrosyyttien mitoosin ja kypsymisen erytrosyyttisarjan prekursorisoluista. Erytropoietiinin erittyminen munuaisissa kasvaa veren menetyksen, erilaisten aneemisten tilojen (raudan, folaatin ja B12-puutteellisten anemioiden, luuytimen leesioihin liittyvien anemioiden jne.) Ja munuaisiskemian (esimerkiksi traumaattisen sokin) kanssa hypoksisten tilojen kanssa.

Myös erytropoietiinin erittyminen munuaisissa lisääntyy glukokortikoidien vaikutuksen alaisena, mikä on yksi mekanismeista, joilla hemoglobiiniarvo kasvaa nopeasti ja veren hapen syöttökapasiteetti stressaavissa olosuhteissa. Hemoglobiinitaso ja erytrosyyttien määrä veressä lisääntyvät muutaman tunnin kuluessa eksogeenisen erytropoietiinin antamisesta.

Erytropoietiini aiheuttaa lisääntynyttä raudan, kuparin, B12-vitamiinin ja folaatin luuytimen saantia, mikä johtaa raudan, kuparin ja B12-vitamiinin pitoisuuksien laskuun plasmassa sekä kuljetusproteiinien - ferritiinin ja transkobalamiinin - vähenemiseen.

Erytropoietiini lisää systeemistä verenpainetta. Se lisää myös veren viskositeettia lisäämällä erytrosyyttimassan suhdetta plasmaan.

Erytropoietiinin muodostumisen mekanismi

Erytropoietiinin muodostumisen määrittävä tekijä on koko organismin ja erityisesti munuais- ten happijärjestelmä. Tämän toiminnon rakenteellinen perusta on hemia sisältävä proteiinisytokromi. Tämän proteiinin oksi-muoto estää IGF-1: n (hypoksian indusoiman tekijän) tuotannon, joka tapahtuu, kun munuaispaine alenee 20 - 40 mmHg. Pelkistetty muoto johtaa IGF-1: n aktiivisuuden lisääntymiseen, minkä seurauksena erytropoietiini kehittyy. Entsyymien (fosfolipaasi, joka lisää prostaglandiinien aktiivisuutta) aktivoitumisen myötä erytropoietiinin tuotantoa stimuloidaan.

Hormonin erytropoietiinin vaikutusmekanismi ja normi terveen ihmisen veressä

Hormoni-erytropoietiinia tuottavat munuaissolut ja vähäisessä määrin maksa. Häntä on tutkittu vuodesta 1905 lähtien, kun ranskalainen Carl Paul Carnot aloitti tutkimuksensa. Sitten hän kirjoitti ensimmäisen teoksen aiheesta - erytropoietiini, mikä se on. Lyhyesti sanottuna se on lycoprotein hubbub, joka liittyy veren toimintaan. Miten se toimii ja mikä aiheuttaa sen puutteen tai ylimäärän kehossa, löytyy edelleen.

Hormonifunktiot

Erytropoietiinia syntyy hypoksian tai hapen nälänhädän vallitessa molekyylitasolla. Inertteihin aivoihin tulon jälkeen erytropoietiini laukaisee punasolujen tai punasolujen synteesin. Ja jo punaiset verisolut alkavat levitä kaikkiin henkilön elimiin niin paljon tarvitaan happea.

Punasolujen määrä veressä laskee jatkuvasti lyhyen elämänsä, noin 3 kuukauden ikäisen, vuoksi. Ja niiden lukumäärän lasku vähenee ja happipitoisuus kehossa. Siksi hormoni erytropoietiini on tarpeen henkilölle jatkuvasti, erytrosyyttien uudistamiseksi ja niiden määrän ylläpitämiseksi veressä vaaditulla tasolla.

Emme saa unohtaa esimerkiksi hapenpuutteen äärimmäisiä tapauksia, joissa on suuri veren menetys tai merkittävä fyysinen rasitus, kun hapen tarve kasvaa merkittävästi.

Sinun täytyy myös ymmärtää, että erytropoieesi, verenmuodostusprosessi, ei voi edetä ilman ”rakennusmateriaalia”, tässä tapauksessa rautaa, B12-vitamiinia ja foolihappoa. Joten yhdessä EPO: n kanssa henkilön tulisi kuluttaa riittävä määrä näitä elementtejä ruoan kanssa tai puhtaana pillereinä tai injektioina.

Eritropoietiinin normaaliin määrään terveellä ihmisellä tulee olla 4,3 - 29 mIU / ml. Mutta kun fyysinen rasitus on pitkittynyt, tämä nopeus kasvaa useita kertoja. Tämä ilmiö esiintyy urheilijoiden tai raskaan fyysisen työvoiman parissa. Hormoneja on kehossaan tuotettava jatkuvasti ja suurina määrinä.

Erytropoietiinin tason rikkominen viittaa siihen, että elimistössä on jonkinlainen patologia. Henkilöllä on ongelmia munuaisissa, maksassa, luuytimessä tai aineenvaihdunnassa. Joka tapauksessa tehdään erytropoietiinin verikoe tarkkaa diagnoosia varten ja sisäisiä elimiä tutkitaan.

Verikoe

Erytropoietiinin analyysi suoritetaan potilaan anemian merkkien ja sen tyypin määrittämiseksi. Tämä tila on ominaista punasolujen alhaiselle pitoisuudelle ja vastaavasti erytropoietiinille.

Anemia voi olla kohtalainen ja vaikea. Jälkimmäinen tila on vaarallinen, koska ilman oikeaa hoitoa potilaan tila pahenee jatkuvasti etenevän taudin vuoksi.

Analyysi suoritetaan säännöllisesti kroonisen munuais- tai maksasairauden tapauksissa. Tällainen veren tilan seuranta on välttämätöntä ihmisen tilan jyrkän huononemisen estämiseksi.

Kun veren punasolujen pitoisuus on suuri, myös erytropoietiinin analyysiin. Loppujen lopuksi on tärkeää selvittää, mikä aiheutti hormonitoiminnan nousua. Lisäksi veren punasolujen runsaus voi aiheuttaa tromboosia, joka voi lopulta johtaa suuren aluksen tukkeutumiseen ja henkilön kuolemaan.

Erytropoietiini on korkea

Erytropoietiinin lisääntynyt pitoisuus, jossa on pieni määrä erytrosyyttejä, on paljon yleisempää kuin päinvastainen tilanne.

Eri patologiat voivat aiheuttaa tällaisen tilan:

  1. Harvinainen sairaus on punaisen luuytimen puhdas aplasia. Sille on ominaista punasolujen alhainen pitoisuus, kun taas leukosyyttien ja verihiutaleiden taso pysyy normaalina.
  2. Krooninen verenmenetys johtaa korkeaan erytropoietiinipitoisuuteen veressä. Esimerkiksi peräaukon sulkijalihaksen tai ruoansulatuskanavan sairauksien heikko verenvuoto.
  3. Anemia voi aiheuttaa punasolujen rakentamisessa mukana olevien hivenaineiden puutetta. Tämä on foolihappo, rauta, B12-vitamiini. Toisin sanoen luuytimessä on paljon hormonia, mutta verisoluja ei ole rakennettu.
  4. Elimistössä voi kehittyä mitä tahansa leukemiaa.
  5. Koska munuaisissa ja lisämunuaisissa tuotetaan erytropoietiinia ja muita hormoneja, näiden aineiden lisääntynyt määrä veressä voi johtua tuumorin esiintymisestä munuaisissa. Yleensä munuaisvauriot johtavat erytropoietiinipitoisuuden - kompressointilukon, valtimon rikkoutumisen ja niin edelleen - rikkomiseen.
  6. Erytropoietiinipitoisuudet ovat lisääntyneet kroonisessa keuhkoputkentulehduksessa tai toisessa virussairaudessa.
  7. Hormonin yliannostus johtaa sydämen vajaatoimintaan ja veren stasisiin.

Yleensä erytropoietiinin kohonneiden pitoisuuksien määrittämiseksi henkilön on tutkittava sisäelimet ja -alukset lähes täydellisesti eri lääketieteellisten laitteiden avulla - ultraääni, röntgen-EKG, tietokonetomografia ja niin edelleen.

Pieni erytropoietiinipitoisuus

Erytropoietiinin alhainen pitoisuus on paljon harvinaisempi ja aiheuttaa hyvin rajoitetun määrän patologioita:

  1. Krooninen munuaisten vajaatoiminta, tämä on tärkein syy erytropoietiinin pitoisuuden vähenemiseen veressä.
  2. Dialyysimenettely vähentää myös erytropoietiinin pitoisuutta, mutta tässä tapauksessa nopeus palautuu nopeasti.
  3. Luuytimen sairauksien, nimittäin proliferaation, osalta veren hormonin määrä ei vaikuta. Siksi sitä pienennetään itsenäisesti.
  4. Vähentää erytropoietiinipitoisuutta voi saada jonkin verran huumeiden steroidityyppiä.
  5. Raskauteen liittyy usein pieni erytropoietiinipitoisuus.

Erytropoietiinianalyysi

Jotta erytropoietiinin analyysin tulos heijastaisi todellista kuvaa, on tarpeen noudattaa useita ehtoja. Ennen 3-5 päivän analyysiä on välttämätöntä kieltäytyä ottamasta steroideja ja hormonaalisia lääkkeitä. Jos tämä ei ole todistuksen mukaan mahdollista, laboratorioteknikko olisi varoitettava tästä, jotta hän tekisi tarvittavat korjaukset tulosten salaustaessa. Myös ennen kuin analyysi ei voi tehdä verensiirtoa tai dialyysiä. 2-3 päivää ennen analyysia sinun täytyy lopettaa urheilun tai kovan fyysisen työvoiman pelaaminen.

Ja viimeinen ehto - kaikki hormonien testit tehdään tyhjässä vatsaan, mukaan lukien erytropoietiini. Ennen kuin luovutat verta, et voi syödä mitään 7-8 tuntia, ja voit juoda vain tavallista vettä.

Erytropoietiinin normalisointi

Käsitellessään kysymystä siitä, mitä erytropoietiini on, tulee selväksi, että sen tason normalisointi veressä riippuu hormonin epätasapainon patologian hoidosta. Toisin sanoen, kun kysta on poistettu munuaisista tai hoidetaan virussairaus, hormonitaso palaa pian normaaliksi.

Mutta prosessin nopeuttamiseksi farmakologia on kehittänyt useita lääkkeitä, jotka auttavat tuottamaan erytropoietiinia nopeammin. Tai korvaa se hoidon ajaksi synteettisillä analogeilla. Myös nämä lääkkeet on määrätty potilaille, joilla on anemia ja krooninen munuaissairaus. Tämä voi olla Epoetin, Erythrostim, Recormon tai Vero-epoetin. Kaikki lääkkeet määrää vain lääkäri, kun kaikki tarvittavat testit ja muut diagnostiset menettelyt on suoritettu.

Kaikki luetellut lääkkeet on määrätty hyvin erityisiin sairauksiin:

  1. Kroonisessa munuaisten vajaatoiminnassa.
  2. Jos munuaisten tai lisämunuaisen hyvänlaatuinen kasvain on. Niitä käytetään myös potilaan toipumisjakson aikana leikkauksen jälkeen kasvain poistamiseksi.
  3. Lääkkeet sisältyvät kuntoutustoimenpiteiden kompleksiin potilaan kemoterapian jälkeen.
  4. Kun anemia on eri tyyppinen.
  5. Lääkkeitä käytetään ennaltaehkäisevänä toimenpiteenä ennen leikkausta ja mahdollisia verenmenetyksiä.
  6. Kun syötät vauvaa, joka on syntynyt painon tai ennenaikaisen puutteen vuoksi.

Lääkkeillä on paljon sivuvaikutuksia, ja ne saattavat aiheuttaa terveysvaikutuksia väärällä annoksella tai annostuksella.

Jos henkilöllä on vakava päänsärky, pahoinvointi, huimaus, oksentelu, ripuli ja kouristuskohtaukset, on mentävä lääkärin puoleen.

On olemassa vaihtoehtoisia lääkkeitä. Ne eivät sisällä puhdasta hormonia erytropoietiinia, mutta beta-epoetiinia. Muuten tätä ainetta kutsutaan rekombinanttiglykoproteiiniksi. Se koostuu 150 aminohaposta, joka sallii sen luoda punasoluja deterministisistä soluista.

Koska tämän lääkkeen koostumus on hyvin samanlainen kuin todellinen hormoni, se voidaan antaa ihon alle tai laskimonsisäisesti. Lääkkeen nopeus ei ole huonompi kuin luonnollinen hormoni, jonka avulla voit nostaa paitsi punasolujen määrää myös hemoglobiinia.

Toinen epoetiinibetan etu on se, että se sisältää rautaa eli rakennusmateriaalia punasolujen tuottamiseksi. Näin ollen beeta-epoetiinia sisältävillä lääkkeillä ei ole vain lääketieteen, vaan myös urheilun. Koska sen vaikutukset tulevat jo 15 kertaa injektion jälkeen.

Erytropoietiini urheilussa

Erytropoietiinin vaikutus kehoon, he tietävät ja urheilukouluttajat. Siksi tätä hormonia sisältäviä valmisteita käytetään laajasti urheilussa. Vaikka kansainvälinen olympiakomitea tunnusti nämä aineet dopingiksi jo vuonna 1990. IOC: n vaatimusten noudattamisen valvonnan monimutkaisuus perustuu siihen, että eläinperäistä erytropoietiinia on erittäin vaikea määrittää kehossa.

Mutta loppujen lopuksi totuus on, että tämä hormoni tuotetaan elimistössä suurimman kuorman aikaan eli kilpailun aikana. Hänen täytyy olla siellä muuten mies kuolee. Ja sen alhainen taso on varsin huolestuttava merkki, mutta ei normi. Mutta on ollut kuolemantapauksia ja yhdistelmä-erytropoietiinia. Useita pyöräilijöitä kuoli 1990-luvun lopulla.

Yhtä tai toisella on lähes mahdotonta tunnistaa erytropoietiinia käyttävä urheilija, joten urheilijat eri puolilta maailmaa käyttävät tätä hormonia sisältäviä lääkkeitä omalla vastuullaan, lisäämällä toistuvasti lihasvoimaa ja ennen kaikkea kestävyyttä.

Epo mikä se on

Erytropoietiini on glykoproteiinihormoni, tarkemmin sanottuna sytokiini, erytropoieesin pääasiallinen säätelijä, joka stimuloi punasolujen muodostumista myöhäisistä progenitorisoluista ja lisää retikulosyyttien saantoa luuytimestä riippuen hapen kulutuksesta. Niin kauan kuin kudoksen hapettumista ei heikennetä, erytropoietiinin pitoisuus sekä kiertävien punasolujen määrä pysyvät vakiona. Erytropoietiinin tuotantoa säännellään sen geenin transkription tasolla, ja koska ainoa fysiologinen ärsyke, joka lisää erytropoietiiniä syntetisoivien solujen määrää, on hypoksia, ei erytropoietiinin tuotanto eikä aineenvaihdunta riippuu plasman pitoisuudesta. Terveen ihmisen kehossa on noin 2,3 * 10 ^ 13 erytrosyyttiä, joiden elinikä on keskimäärin 120 päivää. Näin ollen punasolujen allas olisi päivitettävä jatkuvasti kehossa nopeudella, joka on noin 2,3 solua sekunnissa. Erytroidisten solujen erilaistumisjärjestelmä on tiukasti säänneltävä, jotta verenkierron punasolujen taso pysyisi vakioina normaaleissa olosuhteissa. Tämän järjestelmän on lisäksi oltava erittäin herkkä kehon hapen määrän muutoksille. Tällä hetkellä on saatu paljon tietoa, mikä osoittaa, että erytroidisolujen erilaistumista säätelevä keskeinen tekijä on veressä kiertävä erytropoietiini.

Erytropoietiini on erittäin aktiivinen hormoni, joka vaikuttaa kehossaan pikomolaarisina pitoisuuksina. Pienet veren pitoisuuden vaihtelut johtavat merkittäviin erytropoieesin muutoksiin, ja sen pitoisuuksien normaali vaihteluväli on 4 - 26 IU / l. Siksi, kunnes hemoglobiinipitoisuus laskee alle 105 g / l, erytropoietiinin pitoisuus ei ylitä määritettyä vaihteluväliä, ja sen kasvua ei voida tunnistaa (ellei tiedä sen alkuperäisiä arvoja). Erytrosytoosi johtaa erytropoietiinin tuotannon tukahduttamiseen negatiivisen palautteen mekanismilla. Tämä johtuu paitsi lisääntyneestä hapen saannista kudoksiin kiertävien erytrosyyttien määrän lisääntyessä, myös veren viskositeetin lisääntymisestä. Urheilijalle tämä merkitsee oman hormoninsa tuotannon vähenemistä, kun otetaan käyttöön eksogeeninen ja rikkominen punasolujen tuotantoa säätelevistä mekanismeista. Siksi urheilussa erytropoietiinia dopingina käytettäessä urheilijan tulisi miettiä punasolujen tuotannon tulevaisuutta hänen kehossaan.

Dopingtestit [muokkaa]

Yleensä erytropoietiini havaitaan virtsassa tai verinäytteissä. Veressä havaitaan suurempi todennäköisyys kuin virtsassa. Puoliintumisaika on 5-9 tuntia, eli havaitsemisen todennäköisyys pienenee merkittävästi 2-3 päivän kuluttua.

Hepariinia käytetään peiteaineena [1]. Käytetään myös proteaasien syöttämistä rakkoon katetrin kautta. [2]

Erytropoietiinin fysiologinen rooli [muokkaa]

Jo pitkään kysymys erytropoietiinia normaalisti tuottavista soluista jäi auki. Tämä johtui pääasiassa siitä, että ei ollut suoria menetelmiä hormonin syntetisoivien solujen tunnistamiseksi. Solut tunnistettiin epäsuorilla menetelmillä, mukaan lukien tiettyjen kudosviljelmien kyky syntetisoida tuote in vitro. Uskottiin, että EPO: ta tuottavien solujen roolin tärkeimmät ehdokkaat ovat glomerulaariset solut sekä proksimaalisen tubulan solut. Erytropoietiinigeenin kloonaus sekä in situ -hybridisaatiomenetelmien kehittäminen, jotka mahdollistavat niiden solujen tunnistamisen, joissa tiettyjen geenien ilmentyminen tapahtuu, ovat muuttaneet erytropoietiinia syntetisoivien solujen luonnetta. In situ -hybridisaatio on osoittanut, että erytropoietiinimRNA: ta syntetisoivat solut eivät ole glomerulaarisia tai putkimaisia. Ilmeisesti interstitiaaliset solut tai kapillaariset endoteelisolut ovat EPO-synteesin pääasiallinen kohta munuaisissa. Kuten jo todettiin, tärkein EPO: n tuotantoa säätelevä tekijä on hypoksi. Hypoksisissa olosuhteissa plasmassa kiertävän EPO: n määrä kasvaa noin 1000 kertaa ja saavuttaa 5-30 U / ml. Useissa kokeissa eristetyllä munuaisella on osoitettu, että se sisältää antureita, jotka reagoivat happipitoisuuden muutoksiin.

Toinen J. Schuster ja henkilöstö vuonna 1987 tutkivat erytropoietiinin tuotannon kinetiikkaa vastauksena hypoksiaan. Osoitettiin, että noin 1 tunti hypoksian muodostumisen jälkeen munuaisten erytropoietiinimRNA: n määrä kasvaa ja mRNA: n kumuloituminen jatkuu 4 tuntia, kun hypoksia poistetaan, EPO-mRNA: n taso laskee nopeasti. Plasman ja munuaisten erytropoietiinin määrän muutokset, jotka havaitaan käyttämällä erytropoietiinispesifisiä vasta-aineita, esiintyvät tiukasti rinnakkain mRNA: n määrän muutoksen kanssa vastaavalla viivejaksolla. Tässä työssä saadut tulokset osoittavat, että hypoksian aikana EPO-tuotantoa stimuloidaan de novo.

S. Konryn laboratoriossa vuonna 1989 EPO-synteesin indusointimenetelmää tutkittiin käyttäen menetelmää, in situ -hybridisaatiota munuaisen kuoren kudososiin. Todettiin, että anemian olosuhteissa EPO: n tuotanto kasvaa merkittävästi, vaikka EPO-mRNA: n hybridisaation intensiteetti yksittäisissä soluissa säilyy ennallaan. On osoitettu, että EPO: n lisääntynyt tuotanto liittyy hormonien syntetisoivien solujen määrän kasvuun. Kun normaali hematokriitti paranee, erytropoietiinisyntetisointisolujen määrä vähenee nopeasti, ja muutoksen kinetiikka korreloi EPO-mRNA: n ja kiertävän hormonin määrän vähenemisen kinetiikan kanssa. Histologisen analyysin tiedot osoittavat, että munuaisten kortikaalisen osan interstitiaaliset solut syntetisoivat EPO: n.

On osoitettu, että 5-15% plasman erytropoietiinista aikuisilla on ekstrarenaalista alkuperää. Ja jos alkioissa erytropoietiinin synteesin tärkein paikka on maksa, aikuisorganismissa maksa on myös tärkein elin, joka tuottaa EPO: ta, mutta ekstrarenaalinen. Tämä johtopäätös vahvistettiin viimeisissä kokeissa EPO-mRNA: n havaitsemiseksi eri elimissä. Ilmeisesti EPO: n synteesin pääpaikan muutos ontogeneesin aikana on geneettisesti määritelty tapahtuma.

Erytropoietiinin synteesiä elimistössä välittää merkittävä määrä biokemiallisia kofaktoreita ja stimulantteja. Oletetaan, että hypoksia johtaa hapen määrän vähenemiseen munuaisten spesifisissä aistiosoluissa, mikä aiheuttaa prostaglandiinien tuotannon lisääntymisen glomerulaarisissa soluissa. Prostaglandiinien on osoitettu olevan tärkeässä asemassa erytropoietiinin tuotannon stimuloinnissa. Prostaglandiinisynteesin estäjillä on suppressiva vaikutus EPO: n tuotantoon hypoksian aikana. Pääasiallinen vaikutus prostaglandiinien biosynteesiin hypoksian aikana tehdään ilmeisesti syklo-oksigenaasijärjestelmällä. Hypoksia (sekä koboltti-ionien käyttöönoton) aikana munuaisissa vapautuu neutraaleja proteaaseja ja lysosomaalisia hydrolaaseja, jotka myös osoittavat, että ne stimuloivat myös EPO: n tuotantoa. Lysosomaalisten entsyymien vapautuminen näyttää liittyvän cGMP-tuotannon lisääntymiseen. On osoitettu, että lysosomaaliset entsyymit aktivoituvat proteiinikinaasien osallistumisella, jotka puolestaan ​​aktivoituvat cAMP: n avulla.

Hypoksia-aikana havaitaan fosfolipaasi A2-aktiivisuuden induktiota, mikä johtaa arakidonaattien määrän kasvuun, jotka syklo-oksigenaasin osallistuessa muuttuvat endoperoksideiksi. On huomattava, että hypoksi on optimaalinen syklo-oksigenaasiaktiivisuuden edellytys. On todennäköistä, että kalsiumjärjestelmällä on tärkeä rooli näissä biokemiallisissa tapahtumissa: kalsiumionit stimuloivat fosfolipaasi A: n aktiivisuutta ja prostaglandiinin muodostumista. Prostanoidit puolestaan ​​voivat indusoida adenylaattisyklaasin aktiivisuuden ja laukaista biokemiallisten tapahtumien kaskadin, joka johtaa hydrolaasien fosforylaatioon ja aktivoitumiseen. Mikä on hydrolaasien rooli ja mikä on ketju, joka johtaa lopulta EPO: n synteesin lisääntymiseen, on edelleen epäselvä. Joillakin hypotalamuksen ja aivolisäkkeen järjestelmän hormoneilla, kilpirauhashormoneilla ja joillakin steroidihormoneilla on myös stimuloiva vaikutus EPO: n biosynteesiin. EPO: n tuotannon erityinen induktori on koboltti-ioneja, joiden toimintamekanismi EPO: n biosynteesijärjestelmässä ei ole vielä selvä. Tämä järjestelmä on houkutteleva kokeellinen malli EPO-biosynteesin induktion tutkimiseksi.

Ihmisen erytropoietiinimolekyyli, jossa hiilihydraattikomponentti muodostaa 40-50% molekyylipainosta (glykoproteiinin molekyylipaino on 32-36 * 10 ^ 3 A. e. M. Ja proteiiniosan laskettu molekyylipaino on 18,399 * 10 ^ 3 a. esim.), koostuu 193 aminohappotähteestä. EPO: n isoelektrisen pisteen arvo on alhainen (pH 3,5-4,0), joka johtuu sialihappojen läsnäolosta erytropoietiinin hiilihydraattiketjujen pääteasemissa. Plasman EPO: n isoelektrinen fokusointi polyakryamidigeelissä mahdollistaa useiden fraktioiden tunnistamisen, jotka ovat identtisiä molekyylipainon kanssa, mutta eroavat isoelektristen pisteiden koosta, mikä osoittaa hormonin hiilihydraattiosan rakenteen heterogeenisyyttä. Siaalihappojen lohkaiseminen hoidon aikana neuraminidaasilla tai happohydrolyysin aikana johtaa hormonin vakauden häviämiseen in vivo, mutta ei vaikuta sen aktiivisuuteen in vitro. Nelissä kohdissa glykosidijäämät kiinnitetään proteiiniketjuun, joka voi edustaa erilaisia ​​sokereita, joten on olemassa useita EPO-lajikkeita, joilla on sama biologinen aktiivisuus, mutta hieman erilainen niiden fysikaalis-kemiallisissa ominaisuuksissa.

Ihmisen erytropoietiinin aminohapposekvenssin analyysin tuloksena on tunnistettu kolme potentiaalia N-glykosylaatiokohtaa, jotka sisältävät Asn-X-Ser / Thr-konsensussekvenssin. Kokeissa, jotka koskevat hormonin hoitoa N-glykosidaasilla, spesifisesti lohkaisemalla oligosakkaridiketjut, jotka ovat liittyneet asparagiinitähteeseen N-glykosidisidoksella, varmistettiin, että EPO-molekyylissä on kolme N-glykosylaatiokohtaa. Hormonin O-glykosidaasihoidon kokeiden tuloksena todettiin, että se sisältää myös oligosakkaridiketjuja, jotka on liitetty proteiiniosaan O-glykosidisidoksilla.

Erytropoietiinigeeni (geeni [07q21 / EPO] erytropoietiini) koostuu viidestä eksonista ja neljästä intronista. Geeni koodaa proteiinia, joka koostuu 193 aminohappotähteestä. Tunnistettiin neljä erilaista RNA: ta, jotka liittyvät vuorovaikutukseen erytropoietiinin geenin kanssa, ja uutteissa on kaksi tyyppiä kobolttikloridin lisäämisen jälkeen huomattavasti vähemmän kopioita kuin tavallisissa uutteissa. Nämä tiedot osoittavat negatiivisten säätely- tekijöiden (luultavasti ribonukleoproteiinien) läsnäolon, jotka osallistuvat erytropoietiinigeenin ilmentymisen säätelyyn. Esiintyminen EPO-geenin ilmentymisen negatiivisesta säätelystä vahvisti Semenza G. ja henkilökunta vuonna 1990, jotka saivat sarjan transgeenisiä hiiriä, joilla oli ihmisen EPO-geenin koodaava osa ja S-reunustavan alueen eri fragmentit. Geeniekspression analysointi eri transgeeneissä mahdollisti ihmisen erytropoietiinigeenin kolmen säätelyelementin tunnistamisen:

  • positiivinen säätelyelementti, joka on välttämätön erytropoietiinigeenin ilmentymisen indusoimiseksi maksassa;
  • negatiivinen sääntelyelementti;
  • säätelyelementti, joka on tarpeen indusoituvan geenin ilmentymisen kannalta munuaisissa.

Kokeellisesti osoitettiin, että erytropoietiinigeenin transkriptiota varten on kaksi aloituskohtaa, joissa on useita aloituskohtia. Normaaleissa olosuhteissa transkription aloitus tapahtuu rajoitetusta määrästä kohtia, jotka sijaitsevat molemmissa paikoissa. Anemian indusoinnin tai kobolttikloridilla tapahtuvan hoidon jälkeen toimivien transkription aloituskohtien lukumäärä molemmissa kohdissa kasvaa. Kaikissa tapauksissa erytropoietiinin valmistusta rajoittavat vaikeudet, jotka liittyvät solujen eristämiseen ja viljelyyn, hormonin tuotannon epävakauteen ja lopuksi sen pieneen pitoisuuteen viljelynesteissä.

Periaatteessa erilainen lähestymistapa suurten määrien saamiseksi erittäin puhdistetusta EPO: sta liittyi geeni- ja solutekniikan menetelmien käyttöön. Pyrittiin luomaan erytropoietiinin bakteriaalinen tuottaja. Escherichia coli: ssa tuotettu proteiini tunnistetaan EPO: n vastaisilla vasta-aineilla ja sen molekyylipaino on suunnilleen sama kuin deglykosyloitu ihmisen EPO. On tunnettua, että bakteerisoluissa on glykosylaatiojärjestelmä, joka on olennaisesti erilainen kuin eukaryoottinen. Siksi on mahdotonta saada oikein glykosyloitua proteiinia bakteerisoluissa. EPO: n tapauksessa asianmukaisesti glykosyloituneen glykoproteiinin saaminen on olennaisen tärkeää. Näin ollen bakteerisoluihin perustuvan hormonituottajan luominen on epäkäytännöllistä. Biologisesti aktiivisen sekä in vitro että in vivo erytropoietiinin tehokas tuottaja voidaan saada vain korkeampien eläinten solujen perusteella.

Rekombinantti-EPO: n ominaisuuksien tutkimuksessa osoitettiin, että epätäydellisen hiilihydraattikomponentin läsnäolo (tässä järjestelmässä syntetisoidun erytropoietiinin molekyylipaino on 23 * 10 ^ 3 a.e. m) ei vaikuta hormonin aktiivisuuteen in vitro, vaan vähentää merkittävästi sen aktiivisuutta in vivo. Samalla hiilihydraattiosan täydellinen eliminointi glykosidaasien avulla johtaa hormonin biologisen aktiivisuuden 80%: n häviämiseen in vitro -testissä. Nämä tiedot ovat ristiriidassa olemassa olevien ajatusten kanssa, joiden mukaan EPO: n hiilihydraattikomponentti ei ole ehdottoman välttämätön sen aktiivisuuden kannalta in vitro.

Historiallinen tausta [muokkaa]

Vuonna 1989 suoritettiin yksityiskohtainen analyysi rekombinantti-EPO: n rakenteesta, joka saatiin transfektoimalla soluja kiinanhamsterin munasarjasta ihmisen EPO-genomiin. On todettu, että soluihin syntetisoidaan kaksi EPO-tyyppiä (nimeltään bi- ja tetra-muodot), jotka eroavat N-kytkettyjen hiilihydraattiketjujen haarautumisasteesta. Biomuotoinen EPO, joka sisältää vähemmän haaroittunutta hiilihydraattikomponenttia, eroaa merkittävästi standardina käytetyn natiivin erytropoietiinin biologisesta aktiivisuudesta: bi-muodon EPO: n biologinen aktiivisuus in vivo on 7 kertaa pienempi ja in vitro 3 kertaa suurempi. EPO: n tetra-muodon biologinen aktiivisuus on hyvin lähellä natiivin EPO: n aktiivisuutta. Nämä tiedot osoittavat hiilihydraattikomponentin rakenteen merkittävän roolin erytropoietiinin biologiselle aktiivisuudelle in vivo. Ilmeisesti näiden erytropoietiinin muotojen, jotka sisältävät epätäydellisen hiilihydraattikomponentin, korkeampi in vitro -aktiivisuus liittyy erytropoietiinin ja reseptorien välisten vuorovaikutusten helpottamiseen. Samalla ilmeisesti se on hiilihydraattikomponentti, joka varmistaa hormonin vakauden kehossa ja vastaavasti korkean biologisen aktiivisuuden tason in vivo -testeissä.

1980-luvun puoliväliin mennessä ensimmäinen rekombinantti erytropoietiini saatiin tuomalla ihmisen EPO-geeni (joka sijaitsee ihmisillä seitsemännellä kromosomilla 11q-12q-alueella) munasarjojen hamstereihin. Geenitekniikalla saatu rekombinantti ihmisen p-EPO (recormon) on identtinen aminohappokoostumuksessa luonnollisen ihmisen EPO: n kanssa. Recormon tarjoaa joustavan ja taloudellisen menetelmän anemian tehokkaaksi hoitamiseksi yhdessä korkean turvallisuusprofiilin ja erinomaisen siedettävyyden kanssa. Recormonin käytön myötä verensiirtojen tarve, joka on ylivoimaisesti tavallisin tapa korjata anemiaa, vähenee merkittävästi. Näin ollen lukuisten tutkimusten mukaan Recormonin käyttö sallii normaalien hemoglobiinitasojen palauttamisen ja eliminoinnin korvaavan verensiirron tarpeen anemiaa sairastavilla syöpäpotilailla. Samalla näiden potilaiden elämänlaatu paranee merkittävästi; infektioriski, joka esiintyy, kun anemiaa korjataan verensiirtojen avulla virusten tarttuvien tautien, kuten HIV: n ja C-hepatiitin, hoidon aikana, on merkittävästi pienempi, sillä Recormon valmistetaan sopivaksi laitteeksi lääkkeen antamiseksi ja osoittamiseksi (ruiskun kynä).

Glykosidijäämien koostumuksessa on kuitenkin pieniä eroja, jotka vaikuttavat koko hormonimolekyylin fysikaalis-kemiallisiin ominaisuuksiin. Esimerkiksi eräiden erytropoietiinityyppien sähkövarauksen jakautumisessa havaittiin tiettyjä eroja. Erytropoietiinivalmisteita valmistavat useat lääkeyhtiöt viittä eri tyyppiä: alfa, beeta, retard (NESP), theta ja omega).

Vuodesta 1988 lähtien on käytetty alfa-EPO: ta ja beeta-EPO: ta. Subkutaanisesti niiden biologinen hyötyosuus on noin 25%, maksimipitoisuus veressä - 12-18 tuntia, puoliintumisaika - jopa 24 tuntia (laskimoon annettuna - 5-6 tuntia). Erytropoietiini-retardia (NESP) on käytetty viime vuosina, ja se kestää kauemmin kuin muut EPO-lääkkeet. Theta-EPOa pidetään nykyisin tehokkaimpana ja vähiten allergeenisena, sillä sen puhtausaste on suurin. Tämä johtuu siitä, että se saadaan ihmisen solujen geenitekniikan avulla (jotkut häikäilemättömät urheilijat ja urheilututkijat uskovat, että tämä tekee siitä huomaamattoman). Itse asiassa theta-EPO on vain 99% identtinen ihmisen kanssa. Omega-EPO, joka saadaan hamsterin munuaisista, eroaa eniten kaikista muista ihmisen EPO-valmisteista, joten se on helpoin havaita. Myydään vain Itä-Euroopassa ja Etelä-Amerikassa.

Erytropoietiinivalmisteet [muokkaa]

Eri valmistajien rekombinantti-bio-analogisella a-EPO: lla on jopa Euroopan lääkeviraston ihmisille tarkoitettuja lääkkeitä käsittelevän komitean (CHMP) myönteinen lausunto, jolla voi olla erilaiset ominaisuudet, puhtausaste ja ennen kaikkea erilainen biologinen aktiivisuus. Kun erilaisten valmistajien erytropoietiinivalmisteita analysoitiin, viidestä 12: sta tutkitusta tuotteesta oli merkittäviä poikkeamia vaikutuksen voimakkuudessa eri sarjoissa, kolmessa näytteessä - ei-hyväksyttäviä bakteerien endotoksiinitasoja.

Toisessa tutkimuksessa vertailtiin 11 EPO-valmistetta (jotka on saatu kahdeksalta valmistajalta), jotka olivat edustettuina EU: n ulkopuolisilla markkinoilla, ja tehoaineen (erytropoietiinin) sisällön, tehon ja isoformin koostumuksen osalta. In vitro bioaktiivisuus vaihteli 71–226 prosentin välillä, kun taas 5 näytteen suorituskyky ei vastannut eritelmiä. Isoformikoostumuksen poikkeamien joukossa on yksi tai useampi happamien ja (tai) emäksisten isomuotojen läsnäolo, samoin kuin erilaisten isomuotojen modifioitu osuus. Lisäksi tunnistettiin sarjojen väliset erot; Jotkut tuotteet eivät täyttäneet omia eritelmiä, eli valmistajat eivät toimittaneet riittävää valvontaa tuotantoprosesseissa. Aktiivisen aineosan määrä ei aina vastannut mainittua. Tällaiset poikkeamat mainituista parametreista voivat olla merkittäviä kliinisiä merkityksiä, koska ne voivat johtaa yliannostukseen tai päinvastoin pienemmän annoksen käyttöönottoon. Nämä tiedot osoittavat selvästi uhkan käyttää rekombinanttisia erytropoietiinejä ilman lääketieteellisiä merkintöjä.

Lääketieteellinen käyttö [muokkaa]

Lääketieteellisessä käytännössä erytropoietiinia käytetään eri alkuperää olevien anemioiden, myös syöpäpotilaiden, kroonista munuaisten vajaatoimintaa sairastavien potilaiden hoitoon. Koska, kuten edellä on todettu, kehossa muodostuu endogeenistä erytropoietiinia munuaisissa, kroonista munuaisten vajaatoimintaa sairastavat potilaat kärsivät aina anemiasta. Lisäksi seuraavien patologisten tilojen ja sairauksien yhteydessä havaitaan EPO: n pitoisuuden väheneminen ihmisen veriplasmassa ja vastaavasti erytrosyyttien lukumäärässä:

  • toissijainen polytytemia;
  • oman EPO: n riittämätön stimulointi;
  • hyvänlaatuinen munuaissairaus (hydronefroosi);
  • yleinen kudoshypoksia;
  • heikentynyt munuaisten verenkierto
  • vähentää happipitoisuutta ympäristössä;
  • krooninen obstruktiivinen keuhkosairaus;
  • sydän- ja verisuonijärjestelmän sairaudet (veren poistuminen oikealta vasemmalle);
  • hemoglobiinimolekyylirakenteen poikkeavuudet (sirppisolun anemia);
  • vaikutukset hiilen oksidien kehoon tupakoinnin vuoksi;
  • munuaisvaltimon arterioskleroosi;
  • transplantaation hylkääminen;
  • munuaisten aneurysma.

Ennen rekombinanttisen erytropoietiinin esiintymistä tällaisilla potilailla suoritettiin säännöllisesti sekä kokoveren että erytrosyyttien massan hematransfuusio. Vuoden 1989 jälkeen tällaisten menettelyjen tarve on kuitenkin kadonnut, koska ne on korvattu erytropoietiinivalmisteiden käyttöönotolla. Joissakin tapauksissa myös muita alkuperää olevia anemiaa käsitellään onnistuneesti rekombinantti-EPO: lla. Autologiset verenluovuttajat käyttävät sitä tosiasiaa, että rekombinantti-EPO: n lisääminen indusoi lisää erytropoieesia jopa täysin EPO: n endogeenisen endogeenisen tason kanssa. Vaihtoehtona punasolujen siirtoon, suuriannoksinen EPO-hoito osoittautuu tehokkaaksi anemian vastaiseksi toimenpiteeksi liitännäishoitona kroonisen polyartriitin, AIDS: n, joidenkin kasvainten sekä useiden kirurgisten toimenpiteiden hoidossa. Hypertension kehittyminen sivuvaikutuksena rekombinantti-EPO: n terapeuttisessa käytössä on edelleen epäselvä. Kun hemodialyysi tehdään potilailla, erytropoietiinivalmisteita annetaan yleensä laskimoon. Joissakin tapauksissa sama lääke voidaan pistää ihon alle.

Erytrosyyttien lukumäärän lisääntyminen erytropoietiinin vaikutuksesta puolestaan ​​johtaa happipitoisuuden kasvuun veren tilavuusyksikköä kohti ja vastaavasti veren happikapasiteetin kasvuun ja hapen syöttämiseen kudoksiin. Loppujen lopuksi kasvaa kehon kestävyys. Samankaltaiset vaikutukset saavutetaan keski-vuorilla harjoitettavien harjoitusten aikana, kun hapen puute ilmassa aiheuttaa hypoksian tilaa, joka stimuloi endogeenisen EPO: n tuotantoa. Luonnollisesti hypoksinen koulutus on rekombinanttilääkkeen käyttöön verrattuna fysiologinen mekanismi erytropoieesin säätämiseksi ja hemoglobiinin hapensiirtofunktion parantamiseksi, mikä on itse asiassa tarkoitus käyttää EPO: ta dopingina.

Erytropoietiinin vaikutuksesta hapen kapasiteettiin ja hapen kuljetukseen kudoksissa tämä aine aiheuttaa lisääntynyttä työkykyä urheilussa, jolla on vallitseva aerobinen kestävyys. Tällaisiin urheilutekniikoihin kuuluvat kaikenlaiset yleisurheilulajit, jotka vaihtelevat 800 m: stä, sekä kaikenlaiset hiihto- ja pyöräilymahdollisuudet. Lisäksi viime aikoina kehonrakennusjulkaisuissa alkoi ilmestyä tietoa, että EPO voi korvata anabolisten steroidien massiivisen käytön. EPO-valmisteita käytetään yhdessä stanatsololin, insuliinin ja somatotrooppisen hormonin (STH) kanssa.

Erytropoietiinivalmisteet ovat hyvin siedettyjä farmakologisia aineita, joilla ei ole käytännössä mitään sivuvaikutuksia. EPO: n yliannostus ja hallitsematon käyttö voivat kuitenkin johtaa veren viskositeetin kasvuun ja siten verenkiertoelimistön häiriöiden riskin nousuun, jopa perifeeriseen verisuonten tromboosiin ja keuhkoemboliaan, yleensä kuolemaan. Näiden EPO: n haittavaikutusten riski kasvaa keskiössä tapahtuvan koulutuksen aikana sekä kuivuminen.

On kuitenkin näyttöä siitä, että erytropoietiinilääkkeiden pitkäaikainen käyttö voi olla vaarallista terveydelle ja joskus elämälle. Erityisesti EPO: n käytön myötä urheilijat sitovat jatkuvasti päänsärkyä, jotka kehittyvät veren sakeutumisen ja aivojen verenkierron seurauksena. Lisäksi raudan aineenvaihdunta voi olla häiriintynyt: kehon tarve kasvaa, kun maksassa on suhteellisen pieni määrä. Kun eksogeeninen rauta on otettu käyttöön, se alkaa kerrostua maksassa, minkä seurauksena ylijäämäiseen raudaan liittyvä kirroosi ilmenee 20-25 vuodessa.

Erytropoietiini urheilussa [muokkaa]

Rekombinanttisen erytropoietiinin käytön historia urheilussa (lyhenteet rHuEPO, r-HuEPO, rhu-EPO, rEPO), joita yleisesti käytetään tieteellisessä kirjallisuudessa, alkoi vuonna 1977, jolloin erytropoietiini puhdistettiin ensimmäisen kerran ihmisen virtsasta. Erytropoietiinin käyttöönotto ja valvonta urheilussa ja kilpailussa kielletyn huumausaineen kohdalla käytiin läpi seuraavat vaiheet:

  • 1985 - EPO-geeni kloonattiin;
  • 1987 - rekombinanttinen erytropoietiini tuli ensimmäistä kertaa saataville Euroopassa;
  • 1987-1990 :. - Alankomaiden ja Belgian pyöräilijöiden joukossa on useita kuolemantapauksia EPO: n käyttöön;
  • 1988 - Kansainvälinen hiihtoliitto sisältää dopingilistaan ​​erytropoietiinia;
  • 1989 - FDA (elintarvike- ja lääkevirasto - valtion laitos, joka valvoo lääkkeiden tuotantoa ja jakelua maassa) sallii rekombinantti-EPO: n tuotannon;
  • 1990 - EOK on estänyt erytropoietiinin käytön;
  • 1993-1994 GG. - IAAF toteuttaa professori M. Donikin aktiivisella osallistumisella verinäytteenottomenettelyn kahdeksassa kilpailussa World Cupissa;
  • 1997 - Kansainvälinen pyöräilyliitto ja Kansainvälinen hiihtoliitto hyväksyvät selektiivisen verikokeen suorittamisen ennen kilpailun alkua, asettamalla suurimman sallitun hematokriitin ja hemoglobiinitason. Vaikka vahvistettujen indikaattorien ylitys ei ole syy diskvalifiointiin, tällä menettelyllä pyritään kuitenkin suojelemaan urheilijan kehoa mahdollisesti kohonneiden hemoglobiinin ja hematokriitin aiheuttamien komplikaatioiden esiintymisestä;
  • 1998 - Tiedotusvälineet kertoivat laajalti erytropoietiinin käytöstä urheilussa Tour de Francen pyöräilykilpailussa;
  • 1999 - Intensiivisempi tutkimus luotettavan menetelmän kehittämiseksi EPO: n havaitsemiseksi Sydneyn olympialaisiin.

Koska luonnollisella ja rekombinanttisella erytropoietiinilla on lähes identtinen aminohapporakenne, rekombinantti erytropoietiini on erittäin vaikea erottaa sen fysiologisesta analogista.

Omien erytropoietiinien erittymisen stimuloimiseksi Venäjällä käytetään aktiivisesti ksenon-inhalaatioita. Sochi 2014 -olympialaisissa monet venäläiset urheilijat saivat ksenon-inhalaatiota ennen kilpailun alkua. Dopingtoimi on kieltänyt tämän menetelmän toukokuusta 2014 lähtien.

Doping-ohjaus [muokkaa]

Erytropoietiinin määrittämiseen tarkoitettujen menetelmien moderni arsenaali sisältää suorat ja epäsuorat lähestymistavat. Suora menetelmä perustuu sellaisten vähäisten erojen tunnistamiseen, jotka löydettiin luonnollisen endogeenisen erytropoietiinin ja EPO: n tutkimuksessa, joka on saatu geenitekniikan menetelmällä. Eräät tutkijat yrittivät käyttää sähkövarausjakauman eroja, jotka on muodostettu näille kahdelle EPO-molekyylityypille. Näiden erojen perusteella yritettiin erottaa kaksi molekyylityyppiä käyttäen kapillaarielektroforeesia. Ja vaikka tällainen erottaminen on periaatteessa mahdollista, tämä vaatii suuria määriä virtsaa (korkeintaan 1 litra, joka ilmeisistä syistä ei ole käytännössä hyväksyttävää).

Etusija annetaan epäsuorille menetelmille, jotka vaativat vain pieniä määriä veri- tai virtsanäytteitä. Esimerkkejä epäsuorasta menetelmästä EPO: n havaitsemiseksi ovat seuraavat:

  • poikkeamat normaalitasosta näytteen biologisessa ympäristössä. Tämä merkitsee sitä, että vakiintunut EPO-tason ylitys on erilainen kuin fysiologiset tai patologiset vaihtelut. Tämän kriteerin käyttö on kuitenkin mahdollista vain, jos indikaattorin vaihteluväli on melko kapea verrattuna arvoihin, jotka havaitaan lääkkeen eksogeenisen antamisen jälkeen. Jälkimmäinen on mahdollista vain, kun verinäytettä käytetään näytteenä dopingtestissä;
  • sellaisten biokemiallisten parametrien rekisteröinti, joiden arvo riippuu erytropoietiinin pitoisuudesta. Tällainen lähestymistapa voi perustua liukoisen transferriinireseptorin (sTfR) pitoisuuden mittaamiseen seerumissa, jonka taso kasvaa rekombinantti-EPO: n tuomisen jälkeen. Tämä indikaattori muuttuu kuitenkin samanlaisista muutoksista koulutuksen jälkeen keski-vuorten olosuhteissa;
  • fibriinin ja fibrinogeenin hajoamistuotteiden määrittäminen virtsassa EPO: n antamisen jälkeen.

Tällä hetkellä on käytännössä mahdotonta tunnistaa luotettavasti erytropoietiinin eksogeenisen antamisen tapauksia elimistössä. Siksi veren fysiologisten parametrien muutoksia, jotka havaitaan EPO: n antamisen jälkeen, käytetään kontrolliin. Niinpä kansainvälinen pyöräilyliitto käyttää korkeimman hematokriittiarvon kriteeriä (50% miehillä). Kansainvälinen hiihtoliitto kriteerinä määritteli suurimmat sallitut hemoglobiiniarvot (165 g / l naisilla ja 185 g / l miehillä) sekä retikulosyyttien taso enintään 0,2%. Jos kilpailua edeltävän valvontamenettelyn aikana asetetut raja-arvot ylittyvät, vastaava urheilija keskeytetään osallistumasta kilpailuun terveyden suojelemiseksi. Kuitenkin sekä hemoglobiini että hematokriitti ovat indikaattoreita, joihin monet tekijät vaikuttavat. Erityisesti molemmat indikaattorit voivat muuttua merkittävästi myös yhden keskimääräisen tilavuuden kestävän istunnon jälkeen. Lisäksi näille indikaattoreille on ominaista merkittävä yksilöllinen vaihtelu. Siksi pelkän yli 50 prosentin hematokriittiarvon ylitys ei voi olla todiste erytropoietiinin väärinkäytöstä urheilussa.

Jotta voitaisiin parantaa erytropoietiinilääkkeiden käyttöä dopingina, WADA esitteli urheilijan passien hallinnan moduksen. Veripassi on yksi WADA: n kehityksistä, ja sen ensisijaisena tavoitteena on erytropoietiinin ja sen analogien tunnistaminen. Sen avulla jokaisen urheilijan yhtenäinen tietokonehematologinen profiili muodostuu 30 eri indikaattorista, startereille, niissä urheilulajeissa, joissa kestävyys on tarpeen. Jo 10 maata on liittynyt veren passitusohjelman käyttöönottoon ja parantamiseen, mukaan lukien Ruotsi, Norja, Kanada ja Saksa. Venäjän antidopingvirasto hyväksyy tämän aloitteen, mutta aikoo toteuttaa sen kaikkien lääketieteellisten ja oikeudellisten näkökohtien viimeistelyn jälkeen.

WADA suosittelee urheilijan veripassilla tehtyjen testien yhteydessä laitteiden käyttöä Sysmexiltä (Japani) tai ERMA: n tytäryhtiöltä. Tämä uusimman sukupolven täysin automaattisen hematologian analysaattorimerkki on voittanut maksimaalisen luottamusindeksin verinäytteiden tarkkuudessa.

Intensiivisen harjoittelun ja ammatillisen urheilun aikana on tarpeen suorittaa jatkuvasti hematologinen analyysi punasolujen lukumäärän ja niiden parametrien (tilavuus, hemoglobiinin kylläisyys), hemoglobiinitason ja hematokriitin määrittämiseksi. Hematokriitin ei pidä nousta yli 50%: iin - tämä johtaa veren sakeutumiseen, joka puolestaan ​​on täynnä lihasten ja sisäelimien mikrokierron pahenemista, mikä lisää tromboosiriskiä (trombofilian taipumusta voidaan arvioida D-dimeerimerkillä). Lisäksi tarvitaan raudan aineenvaihdunnan täydellistä valvontaa (seerumin rautapitoisuus, kokonais- ja tyydyttymättömän raudan sitoutumiskapasiteetti, raudan kylläisyyden prosenttiosuus, transferriini, ferriitti, C-reaktiivinen proteiini) ja foolihapon ja B12-vitamiinin tason määrittämistä veressä. Kaikki nämä yhdisteet ovat välttämättömiä asianmukaista erytropoieesia varten ja niiden puutetta ei pitäisi sallia urheilun aikana. Edellä mainittujen testien lisäksi on tarpeen valvoa erytropoietiinin määrää.

Katso myös [muokkaa]

Varoitus [muokkaa]

Anabolisia lääkkeitä voidaan käyttää vain reseptillä ja ne ovat vasta-aiheisia lapsille. Annetut tiedot eivät vaadi potentiaalisten aineiden käyttöä tai jakelua, vaan niiden tarkoituksena on vain vähentää komplikaatioiden ja sivuvaikutusten riskiä.

Epo mikä se on

Erytropoietiini dopeina

Mikä on erytropoietiini? Erytropoietiini (EPO) on glykopeptidihormoni, joka kontrolloi punasolujen (erytrosyyttien) muodostumista luuytimen kantasoluista hapen kulutuksen mukaan. Erytropoietiinia itse tuotetaan pääasiassa munuaiskudoksessa.

Erytropoietiinimolekyyli koostuu aminohapoista. Nelissä kohdissa glykosidifragmentit kiinnitetään proteiiniketjuun sopivien linkkien avulla. Ne ovat erilaisia ​​sokereita, joten on olemassa useita EPO-lajikkeita, joilla on sama biologinen aktiivisuus, mutta hieman erilainen niiden fysikaalis-kemiallisissa ominaisuuksissa.

Rekombinantti (synteettinen), ihmisen erytropoietiini, joka on saatu geenitekniikalla (lyhenne rHuEPO, r-HuEPO, rhuEPO, rEPO), jota käytetään yleisesti tieteellisessä kirjallisuudessa, on identtinen aminohappokoostumuksessa luonnollisen ihmisen EPO: n kanssa. Glykosidifragmenttien koostumuksessa on kuitenkin pieniä eroja. Nämä erot määrittävät koko hormonimolekyylin happo-emäksen ominaisuudet.

1977 Ensimmäistä kertaa EPO puhdistetussa muodossa eristetään ihmisen virtsasta.

1988 Rekombinantti-EPO: n sarjatuotannon aloittaminen.

1988-1990 GG. EPO: n käyttöön liittyy muutamia hollantilaisia ​​ja belgialaisia ​​pyöräilijöitä.

1990 KOK on kieltänyt EPO: n käytön.

1993-1994 GG. IAAF toteuttaa verinäytteenottomenettelyn Grand Prixin kahdeksassa vaiheessa.

1998 Tiedotusvälineissä käsitellään laajasti EPO: n käyttöä Tour de Francen polkupyöräretkellä.

EPO: n toiminta. EPO stimuloi retikulosyyttien muuttumista kypsiksi erytrosyyteiksi hematopoieettisen luuytimen alkion koostumuksessa. Punasolujen määrän lisääntyminen johtaa happipitoisuuden lisääntymiseen veren tilavuusyksikköä kohti ja vastaavasti hapen kapasiteetin ja hapen syöttämisen lisääntymiseen kudoksiin. Loppujen lopuksi kasvaa kehon kestävyys. Samankaltaisia ​​vaikutuksia saavutetaan myös midlandien koulutuksessa.

Mihin tarkoituksiin rhEPOa käytetään lääketieteessä? Elimistössä EPO muodostuu munuaisiin. Siksi kroonista munuaisten vajaatoimintaa sairastavat potilaat kärsivät aina anemiasta. Ennen rekombinanttisen EPO: n syntymistä tällaisilla potilailla suoritettiin säännöllisesti sekä kokoveren että punasolujen verensiirtoja. Vuoden 1989 jälkeen tällaisten menettelyjen tarve on kuitenkin kadonnut, koska ne on korvattu EPO-valmisteiden käyttöönotolla. Joissakin tapauksissa myös muita alkuperää olevia anemiaa käsitellään onnistuneesti rekombinantti-EPO: lla. Vaihtoehtona punasolujen siirtoon EPO: n suurilla annoksilla annettava hoito on tehokas anemian vastainen toimenpide kroonisen polyartriitin, AIDSin, tiettyjen kasvainten sekä kirurgisten toimenpiteiden ja verenmenetysten hoidossa.

Missä urheilussa käytetään dopingina rekombinanttia EPO: ta? Koska EPO vaikuttaa merkittävästi veren happikapasiteettiin ja hapen antamiseen kudoksiin, tämä lääke parantaa suorituskykyä niissä urheilulajeissa, jotka vaativat aerobista kestävyyttä - nämä ovat kaikenlaista yleisurheilua, joka kulkee 800 metristä sekä hiihto ja pyöräily.
Mikä on rekombinantti-EPO: n käytöstä aiheutuva riski? Rh-EPO on hyvin siedetty farmakologinen lääke, jolla ei ole käytännössä mitään sivuvaikutuksia. EPO: n yliannostus ja hallitsematon käyttö voivat kuitenkin lisätä veren viskositeettia ja näin ollen lisätä sydän- ja aivoverisuonten häiriöiden riskiä. Näiden EPO: n haittavaikutusten riski kasvaa keskiössä tapahtuvan koulutuksen aikana sekä kuivuminen.

Onko mahdollista havaita jälkiä rekombinantti-EPO: n käytöstä?

Tällä hetkellä ei ole todistettuja menetelmiä, joiden avulla urheilijat voivat käyttää EPO: n dopingin jälkiä luotettavasti. Koska luonnollisilla ja rekombinantteilla erytropoietiineillä on identtinen aminohapporakenne, rh-EPO on lähes erottamaton luonnollisesta vastineesta.

EPO: n määritysmenetelmien moderni arsenaali sisältää suorat ja epäsuorat lähestymistavat. Suora menetelmä perustuu luonnollisen EPO: n ja EPO: n erottamiseen, joka on saatu geenitekniikan menetelmällä, niiden vähäisten erojen perusteella, jotka havaittiin niiden tutkimuksen aikana. Erityisesti elektroforeettisen erottamisen menetelmä voi osoittaa erilaisten erytropoietiini- isoformien jakautumisen, joilla on erilaiset glykosidifragmentit. Luonnollinen EPO liittyy pääosin glykosidisiin ryhmiin, joissa on suurempi happamuus, kun taas rekombinanttiset osat on liitetty osiin, joilla on alkalisia ominaisuuksia. Menetelmä virtsanäytteen ja itse erottamisen puhdistamiseksi on melko monimutkainen ja vaatii suuria määriä virtsaa (enintään 1 litra). Tämän seurauksena etusija annetaan nyt epäsuorille menetelmille, jotka vaativat vain pieniä määriä veri- tai virtsanäytteitä.

Esimerkkejä EPO: n epäsuorasta havaitsemisesta:

  • Poikkeamat normaalista biofluidipitoisuuden tasosta. Tämä seikka merkitsee sitä, että vakiintunut EPO-taso on erilainen kuin fysiologisen tai patologisen luonteen sallitut vaihtelut. Tämän kriteerin käyttö on kuitenkin mahdollista vain, jos indikaattorin vaihteluväli on pieni verrattuna arvoihin, jotka havaitaan lääkkeen eksogeenisen antamisen jälkeen. Jälkimmäinen on mahdollista vain, kun verinäytettä käytetään näytteenä dopingtestiin.
  • Biokemiallisten parametrien rekisteröinti, joiden arvo riippuu EPO: n pitoisuudesta. Tällainen lähestymistapa voi perustua liukoisen transferriinireseptorin (sTfR) pitoisuuden mittaamiseen seerumissa, jonka taso kasvaa rekombinantti-EPO: n tuomisen jälkeen. Tämä indikaattori muuttuu kuitenkin samanlaisista muutoksista koulutuksen jälkeen keski-vuorten olosuhteissa.
  • Fibriinin ja fibrinogeenin hajoamistuotteiden määritys virtsassa EPO: n antamisen jälkeen.

EPO: n väärinkäytön tapausten dopingtarkastus.

Tällä hetkellä on käytännössä mahdotonta tunnistaa luotettavasti EPO: n eksogeenisen antamisen tapauksia kehoon. Siksi alustavan valvonnan kannalta käytetään veren fysiologisten parametrien muutoksia, jotka havaitaan EPO: n antamisen jälkeen. Kansainvälinen pyöräilyliitto käyttää näin ollen korkeimman hematokriittiarvon kriteeriä (miehille 50 tilavuusprosenttia). Kansainvälinen hiihtoliitto on asettanut kriteeriksi korkeimmat hemoglobiiniarvot (16,5 g% naisille ja 18,5 g% miehille).

Jos kilpailua edeltävän valvontamenettelyn aikana asetetut raja-arvot ylittyvät, vastaava urheilija keskeytetään osallistumasta kilpailuun hänen terveytensä suojelemiseksi. Kuitenkin sekä hemoglobiini että hematokriitti ovat indikaattoreita, joihin monet tekijät vaikuttavat.

Erityisesti ne voivat merkittävästi muuttua jopa yhden harjoituksen jälkeen keskimääräisen tilavuuden kestävyydestä. Lisäksi näille indikaattoreille on ominaista merkittävä yksilöllinen vaihtelu. Siksi jopa yli 50-prosenttinen hematokriittiarvo ei voi olla todiste EPO: n väärinkäytöstä.

Meistä

Miesten lisääntymisterveys riippuu sukupuolihormonien tasosta ja suhteesta. Nämä steroidit tuotetaan Leydig-soluissa (kiveksissä) ja lisämunuaisen verisuonikerroksessa. Vahvemman sukupuolen edustajissa normaalisti esiintyy merkittävästi "uros" -hormoneja (androgeenejä) "naaras" (estrogeeni).